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      流式细胞术

      功能性染料和抗体偶联荧光团的使用为研究细胞生物学的各个方面提供了不可或缺的工具,包括蛋白表达、细胞增殖和分化、细胞信号通路、酶活性、基因调控、细胞谱系、凋亡、自噬和化疗耐药。目前的仪器可以同时定量分析多达12个参数,每个参数都是在单个细胞水平上进行的,便于混合细胞群体和罕见细胞类型的高含量分析。核心设施为研究人员提供分析开发、数据采集和各种数据分析188bet体育网址技术的技术专业知识。核心人员不断地与客户合作,开发新的检测方法或对现有的检测方法进行复合,以满足用户的研究目标。188bet体育网址常规的和最近发展的分析的例子包括:

      • 高达6型彩色免疫型测定Hoechst 33342挤出侧群(SP)干细胞在白血病和实体瘤中
      • 多重细胞内细胞因子染色对免疫反应的表征
      • MHC/肽四聚体染色对淋巴细胞群免疫反应性的研究
      • 胺反应性染料的实时/死区歧视允许固定生物隐形样品
      • 细胞周期和DNA倍性分析:EB、DAPI、BrdU、Hoechst、DyeCycle、Ki67、PCNA、AO、核仁抗原、细胞周期蛋白和p-组蛋白H3
      • Ca + +动员
      • 细胞凋亡:TUNEL,SUBG1,膜蛋白V,胱天序激活,线粒体膜电位(CMXRO,TMRM,JC-1),BCL-2,BAX,BCL-X,BAG-1,FAS等
      • 细胞划分历史:CFSE和PKH26允许确定实际细胞部门的数量
      • 转基因检测:CFP、GFP、YFP、RFP、beta-gal
      • 组蛋白乙酰化和蛋白磷酸化:p-Erk1/2, p-Stat 1, p-Stat 3, p-Stat 5, p-Stat 6和p-Akt
      • 细胞内细胞因子染色
      • MHC /肽四聚物染色
      • 癌基因:p53、c-myc、p21和ras
      • 9色免疫表型(结合以上许多)

      质量血细胞计数

      质量细胞仪利用金属标记的抗血清的单细胞分辨率对生物活性分子对样品的高尺寸定量分析。虽然类似于传统的荧光的流式细胞术,但使用金属标签的使用消除了补偿的需求,并减轻了对可检测的参数数量的限制。质量细胞仪使用与镧系元素和贵金属的非放射性同位素共价标记的抗体,作为标签以定量方式进行大规模的多体流式细胞术。目前,系统可以使用大约40个参数,其理论极限为100.通过加热具有射频(RF)能量的流动氩气流获得的高温等离子体。在近似阳光表面的条件下,样品蒸发,雾化,并在流过等离子体时电离。高速质量分析提供了识别样品中包含的元素的“质量指纹”。注释的属性包括:宽线性动态范围(最多9幅度),卓越的灵敏度(每万亿的子部分,或缩小仪/微升,检测),巨大的丰富敏感性(相邻同位素之间的<10-4重叠),计数统计学限于精度,绝对量化和伴随基质的耐受性。

      细胞分类

      源自多道琼布分析的信息是通过将任何所需细胞群与高速细胞分选用于培养的能力和通过分子生物学和生物化学技术进行进一步表征的能力补充。分类应用程序的示例包括:

      • 造血祖细胞和干细胞分选(如CD34+/38-, CD34+/38+, CD34+38-123+, Lin-/Sca1+/ c-kit+, Hoechst 33342 SP细胞,Aldefluor)
      • 基于CD45RA/CCR7表达的记忆/Naïve淋巴细胞亚群分类
      • 基于CD127 / CD25表达的调节性T细胞分选
      • 上面列出的所有测定可以适用并组合用于细胞分选

      激光扫描血细胞计数

      具有荧光检测和定量的基于滑块的系统,可以从沉积在载玻片上的细胞中分析最多三种荧光料。可以使用该技术分析分类,粘附或珍稀肿瘤或干细胞的FACS。蛋白质表达数据可以从少数为几百个细胞获得。

      共焦显微镜

      激光扫描和旋转磁盘系统允许定位和共定位的细胞和亚细胞成分和细胞相互作用在固定和活的样品。该系统在观察组织或培养标本的多细胞结构时特别有用。核心设施为研究人员提供了图像采集、三维重建和时间序188bet体育网址列观测以及各种图像处理和分析功能的工具和技术。这两种系统都配置为允许活细胞的纵向分析。

      多光谱成像

      NC设施具有外延荧光显微镜,配备了CRI Nuance MultiSpectral成像相机,用于荧光或亮田成像。该相机允许捕获Lambda堆栈,横跨发射波长的图像系列。通过捕获完整的发射光谱,可以执行更完整和准确的分析。该系统能够通过使用LCD可调滤波器执行这些任务。该系统非常适合消除自发荧光和量化各种信号。

      抗体银行

      与重金属同位素缀合的Cytof抗体具有重金属同位素之间的低光谱重叠的优点,允许高于荧光流式细胞术的高分辨率更多的分子靶标。该核心具有超过700种Cytof-Ready抗体的抗体库,用于在ILABS服务请求中可用的人和小鼠。请联系核心以获取更多信息。

      Astrolabe.

      Astrolabe诊断是用于细胞计数分析的云基础解决方案。Astrolabe Diagnostics模型数据200次,并在几个小时内提供全面的深入分析报告。他们的服务可在ILABS服务请求中提供。请拜访https://app.astromediagagnostics.com/tutorial.为更多的信息。

      Cytek极光

      来自Cytek Biosciences的先进的流式细胞术系统Aurora有5个激光器,3个散射通道和64个荧光通道。Aurora是一款全光谱流式细胞仪,在其荧光检测系统中不使用任何光学色散元件。凭借其创新的技术,Aurora收集了整个发光光谱,适用于高复杂的应用。

      IsoPlexis IsoLight

      Isoplexis等光系统在单细胞水平评估T细胞对免疫治疗的反应。自动化系统运行的IsoCode芯片旨在理解和描述单个细胞之间的差异,绘制每个样本的数千个细胞,并处理由IsoLight软件生成的数据。

      指控

      服务 而不援助
      (每小时)
      协助下
      (每小时)
      MD安德森用户 流式细胞术分析 50美元 70美元
      细胞分类 60美元 85美元
      共焦成像 45美元 60美元
      多光谱成像 45美元 60美元
      Epifluorescent成像 15美元 $25
      彩色成像 15美元 $25
      活细胞成像 $300
      质量血细胞计数 85美元
      成像质量血细胞计数 50美元
      金属抗体标记 85美元 160美元
      极光 65美元 $75
      IsoPlexis IsoLight
      Astrolabe. 40美元每样
      非MD Anderson用户 流式细胞术分析 71.43美元 100.00美元
      细胞分类 57.14美元 107.14美元
      共焦成像 64.29美元 85.71美元
      多光谱成像 64.29美元 85.71美元
      Epifluorescent成像 21.43美元 35.71美元
      彩色成像 35.71美元
      活细胞想象 428.57美元
      质量血细胞计数 121.43美元
      成像质量血细胞计数 71.43美元
      金属抗体标记 121.43美元 228.57美元
      极光 92.86美元 107.14美元
      IsoPlexis IsoLight 214.29美元
      Astrolabe. 57.14美元/样本

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