CRISPR/Cas9基因的原核注射靶向

利用CRISPR技术进行基因敲除

为了获得使用CRISPR技术的基因敲除小鼠，由研究者提供的SGRNA或CRRNA / TRRNA将与CAS9蛋白共注入核核胚胎中。存活的胚胎将转移到寄养女性的输卵管中。由该程序产生的所有幼崽都是通过吲哚形成的敲除突变的潜在马赛克。幼崽将转移到调查员进行分析，然后与F1代交配以建立种系中的突变。

服务要求、保证和费用

• sgRNA或crRNA/trRNA必须从已批准的供应商获得。请与GEMF联合主任联系，寻求建议。至少需要2µg的sgRNA。
• 将安排两天的注射日，适用于CRISPR / CAS9淘汰项目。
• 我们不能保证正确的定位。
• 由于专利法规，CRISPR注射目前可能只提供给MD Anderson研究人员或UT研究人员缺乏基因修饰服务的机构。
• 敲门注射费用：MD Anderson调查员的1,450美元，其他UT调查人员2,378美元
  
• 额外注入天（根据要求）：725美元/天
• 体外转录额外费用(如果需要):MD Anderson研究者220美元
• 可能需要10个注射囊胚进行sgRNA分析:MD Anderson研究人员80美元，其他UT研究人员131美元。
  

基因敲入使用CRISPR技术

为了使用CRISPR技术获得基因敲击小鼠，研究者需要提交DNA（用于同源性驱动的修复）和SGRNA或CRRNA / TRRNA。这些材料将与Cas9蛋白混合并注射到原核胚胎中。存活的胚胎将转移到寄养女性的输卵管中。由该程序产生的所有幼崽都是潜在的各种突变的马赛克，包括通过诱导形成发生的敲除突变，纳入含有所提供的一些或所有DNA的突变或所有这些的突变。幼崽将转移到调查员进行分析，然后与F1代交配以建立种系中的突变。

服务要求、保证和费用

• sgRNA或crRNA/trRNA必须从已批准的供应商获得。请与GEMF联合主任联系，寻求建议。至少需要2µg的sgRNA。
• HDR的DNA可以作为双链质粒或SS寡核苷酸供体供应。如果纯化，则需要至少3μg。为了通过GEMF纯化，需要至少30μg。请咨询Gemf Co-Director，以协助确定最佳DNA捐赠者以实现您的目标。
• 将安排三天的注射天，用于CRISPR / CAS9敲入项目。
• 我们不能保证正确的定位。
• 由于专利法规，CRISPR注射目前可能只提供给MD Anderson研究人员或UT研究人员缺乏基因修饰服务的机构。
• 注射的费用:MD安德森研究人员2200美元，其他UT研究人员3607美元。
  
• 额外的注射天（可根据要求）：730美元/天。
• 体外转录额外费用(如果需要):MD Anderson研究者220美元
• 10个注射胚泡可以要求SGRNA分析：MD Anderson调查人员80美元，来自缺乏基因修改服务的UT机构的其他UT调查人员131美元。